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时间15-30min。
平板计数琼脂培养基的灭菌温度121摄氏度，时间15-30min。这是灭菌常用的时间温度，在培养基不含糖并且各种成分均相对耐热的情况下均使用这一温度和时间。
平板计数琼脂配置好后能在2-5摄氏度的温度下存放,一般能放几个月,只要不污染,不处于干燥的环境下，问题就不大。
平板划线法为什么不能计数，稀释涂布平板法为什么可以计数和纯化。
微生物平板涂布注意事项：
1、样品要准确称取待测样品l0g，放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中，用手或置摇床上振荡20min，使微生物细胞分散，静置20-30s，即成10-1稀释液来源:https://maiya369.com/cshi/202503-201.html。
2、用稀释平板计数时，待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时，稀释度应高，反之则低。来源:https://www.maiya369.com/cshi/202503-202.html
3、涂抹平板计数法与混合法基本相同，所不同的是先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中，待凝固后编号，然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上。
涂布平板法的特征：来源:https://www.maiya369.com/cshi/202503-159.html
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞来源:https://maiya369.com/cshi/202503-152.html。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在来源:https://www.maiya369.com/zhishi/202412-49.html。
再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数来源:https://www.maiya369.com/zhishi/202412-111.html。
此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些成品检定（如杀虫菌剂等）、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验来源:https://maiya369.com/cshi/202412-129.html。来源:https://www.maiya369.com/cshi/202503-173.html
百度百科—涂布平板法
平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环接种针的时候也会杀死一部分菌类。
稀释涂布平板法是稀释一组浓度梯度，在合适的稀释浓度可以确定菌类的密度，通过计算可以得知原液的浓度来源:https://maiya369.com/cshi/202503-194.html。因为长成的是一个真菌或者细菌分裂而来互不相接触的菌落 所以可以纯化。
把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。通过反复划线分离，可获得微生物的纯种。
扩展资料：
因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法来源:https://maiya369.com/cshi/202412-112.html。
其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的微生物悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。
大多数细菌和真菌，用平板法分离通常是满意的，因为它们的大多数种类在固体培养基上长得很好。并不是所有的微生物都能在固体培养基上生长，例如一些细胞大的细菌、许多原生动物和藻类等，这些微生物仍需要用液体培养基分离来获得纯培养。
百度百科--划线平板
百度百科--涂布平板法来源:https://maiya369.com/xwzx/202412-144.html
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