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第三问，首先看上面那一条链，有两个识别位点，下面那一条链有三个不同数量的片段，而那三个不同数量的化分依据就是上面那一条链的两个识别位点。所以，重要的不是怎么切，而是有没有这个位点。有的话，就能用下面那一条链下面的数字去计算来源:https://www.faiemp.cn/bkjj/202412-43.html。所以呢，正常人能切出3个片段，患者因为在放大的那个区域没有CCGG那个识别位点，所以就少了一个切割位点。所以只能切出2个片段。长度分别为290+170和220。

第四问，答案应该是P﹢（正常基因），首先，题目中有说明，题目上的是p53基因的部分区域，也就是说，除了这一段，还得有另一段才是完整的人的p53基因来源:https://faiemp.cn/cshi/202412-30.html。而在那没有被展示出来的那一段上，可能还有一个该酶的切割位点。所以能被切出4段来来源:https://faiemp.cn/bkjj/202412-123.html。再看题中有出现170、220、290三个与图中正常人p53基因被切割碱基对数量相符的片段，因此可以推测该人的p53基因型是正常的。

回答完毕，请查收，本人高中是学生物的，大学也是学生物工程的，所以答案正确度应该较高，请采纳。谢谢

2011江苏高考生物第33题 33．（8分）请回答基因工程方面的有关问题： ②(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原

4.以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。来源:https://www.faiemp.cn/cshi/202501-159.html

原核生物没有POLYA尾，不易进行反转录。来源:https://ewtuny.cn/cshi/202412-11.html

5.Mut+能够快速利用甲醇为碳源，而Muts则不能利用甲醇为碳源。所以Mut+能够在含甲醇（MM)平板也快速生长，而Muts只能在含葡萄糖（MD)平板快速生长。

6.切口平移法(nick translation)是利用大肠杆菌DNA聚合酶I (E.coli DNA polymerase I) 的多种酶促活性将标记的dNTP掺入到新形成的DNA链中去，形成均匀标记的高比活DNA探针来源:https://www.ewtuny.cn/zhishi/202412-9.html。其操作方法如下：

(1) 取1ug DNA溶于少量无菌双蒸水中，加入5?l距离大约10×切口平移缓冲液 ( 0.5mol/L Tris－HCl，PH7.2；0.1 mol/L MgSO4 ；1mmol/L二硫苏糖醇；500?g/mL牛血清白蛋白)，加入除标记物(如来源:https://ewtuny.cn/xwzx/202412-79.html?-32 p-datp)外的其它三种dNTP(如dCTP，dGTP，dTTP)溶液，20mmol/L溶液各1来源:https://www.faiemp.cn/cshi/202412-122.html?l。

(2) 加入100?ci(10?l)标记物溶液，加入无菌双蒸水至终体积为46.5ul,混匀，加入0.5ul稀释的DNaseI溶液，混匀；加入1ul(约5单位)E.coli DNA polymerase I，混匀。

(3) 置14-16℃反应1-2小时。

问一道关于基因工程的题

②由于题图中的引物A和引物B均不在该片段的端点，因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，通过自行绘图可推知，第二轮中亦不会出现等长的，需到第三轮来源:https://faiemp.cn/bkjj/202412-72.html。来源:https://www.ewtuny.cn/bkjj/202412-65.html

目的基因的整合位点是随机的，而且不一定只发生单个质粒发生整合，也有可能多个位点都发生整合，比如整合了2个抗性基因，一种可能是在一对同源染色体上，还有一种可能是在两条非同源染色体上。若是前者则会使植株变为抗性的纯合子（RR），相对于野生型植株（rr），这样杂交得到的后代应该基因型全为Rr，表型全为抗性；若是后者，转化植株虽然有2个抗性基因但是位于非同源染色体上，在杂交时相当于非同源染色体基因之间的自由组合，只要产生配子含有抗性基因(R)则与野生型配子(r)结合，就会产生抗性植株，2个R分到一个配子的概率25%，一个R的概率50%，1个R都没有的概率25%，因此后代表型会出现3:1的分离比，这和植株2与野生型杂交产生的结果相同。植株1应该是只整合了一个R到基因组上来源:https://faiemp.cn/xwzx/202412-69.html。这种与隐性纯合子杂交的方法是测交。抗性植株筛选是将外植体接种到还有卡那霉素的培养基上培养进行筛选来源:https://www.faiemp.cn/zhishi/202412-91.html。这对相对性状符合孟德尔的分离定律和自由组合定律。错误的是B。

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